Les consommateurs comptent sur l'identification précise des espèces botaniques et la quantité de composés marqueurs, notamment en ce qui concerne l'efficacité sur l'humeur et le stress. La LC-MS/MS valide l'identité et la puissance des ingrédients, garantissant ainsi une qualité premium constante. Elle est capable de détecter des composés jusqu'à des parties par billion (10−12). Les consommateurs peuvent donc avoir confiance en des produits qui leur conviennent.
Si la HPLC est le spécialiste par excellence de l'identification et de la quantification, la LC-MS/MS est la solution idéale. Elle est capable de réaliser tout ce que la HPLC peut faire, mais avec plus de précision et de précision. Elle y parvient grâce à une micropompe à très haute pression (15 000 psi), associée à un double détecteur/réseau de photodiodes (PDA) et à un spectromètre de masse plus puissant. Elle est utilisée lorsqu'une sensibilité extrême est requise.
Il s'agit actuellement de l'outil d'analyse le plus avancé et le plus polyvalent. Il permet des mesures extrêmement précises, en parties par unité. billion plutôt que des milliards ou des millions… Le LC-MS/MS est capable d’analyser efficacement les herbes et les composants médicinaux.
Le LC/MS combine les capacités de séparation avancées d'un HPLC avec les puissantes capacités analytiques d'un spectromètre de masse.
Un échantillon est injecté dans le système UPLC et séparé en ses différents composants. Ces derniers pénètrent dans le MS par une interface d'électropulvérisation, où une ionisation très rapide a lieu. À ce stade, les spectres de masse des composants peuvent être utilisés pour une analyse précise de l'échantillon.
Le principal avantage de ce système est qu’il génère des mesures rapides, précises et extrêmement précises en créant une signature électronique d’un composé.
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La chromatographie liquide à ultra-haute performance couplée à la spectrométrie de masse (UPLC-MS) est un outil d'analyse puissant utilisé pour la séparation, l'identification et la quantification de composés dans des échantillons complexes. L'UPLC-MS allie les avantages de la chromatographie liquide à ultra-haute performance (UPLC) aux capacités de la spectrométrie de masse, offrant une vitesse, une sensibilité et une sélectivité accrues. Voici les principaux aspects de l'UPLC-MS en tant qu'outil d'analyse :
Chromatographie liquide à ultra-haute pression (UPLC) :
- Principe:
- L'UPLC fonctionne sur les mêmes principes que l'HPLC traditionnel mais avec des améliorations significatives en termes de taille des particules de colonne et de pression du système.
- L'UPLC utilise des colonnes avec des tailles de particules inférieures à 2 micromètres, permettant une résolution plus élevée et des séparations plus rapides.
- Avantages de l'UPLC :
- Vitesse accrue : Temps d'analyse plus courts grâce à une efficacité accrue et à des largeurs de pic réduites.
- Résolution améliorée : Séparation améliorée des mélanges complexes, conduisant à des pics plus nets et mieux définis.
- Taille de l'échantillon réduite : Des volumes d’échantillons plus petits sont nécessaires pour l’analyse.
- Instrumentation:
- Les systèmes UPLC comprennent une pompe haute pression, un injecteur, une colonne UPLC avec de petites tailles de particules et un détecteur.
- Les systèmes UPLC sont conçus pour résister à des pressions élevées, dépassant généralement 15 000 psi (1 000 bar).
Spectrométrie de masse (MS) :
- Principe:
- La spectrométrie de masse est une technique qui ionise les composés et sépare les ions en fonction de leur rapport masse/charge (m/z).
- La spectrométrie de masse fournit des informations sur le poids moléculaire, la structure et les modèles de fragmentation des analytes.
- Avantages de MS :
- Haute sensibilité: La spectrométrie de masse est très sensible et capable de détecter des composés à de faibles concentrations.
- Informations structurelles : Fournit des informations structurelles grâce à des modèles de fragmentation, facilitant l'identification des composés.
- Détection sélective : Les spectromètres de masse peuvent être hautement sélectifs, réduisant ainsi les interférences des composants de la matrice.
- Instrumentation:
- Les systèmes MS se composent d’une source d’ionisation, d’un analyseur de masse et d’un détecteur.
- Les techniques d’ionisation courantes comprennent l’ionisation par électrospray (ESI) et l’ionisation chimique à pression atmosphérique (APCI).
- Différents analyseurs de masse, tels que le quadripôle, le temps de vol (TOF) et le piège à ions, sont utilisés en fonction des exigences analytiques.
Couplage UPLC-MS :
- Séparation efficace :
- Le système haute pression de l'UPLC facilite les séparations chromatographiques efficaces, produisant des pics étroits et bien résolus.
- Détection sensible :
- Le couplage de l'UPLC avec la MS permet une détection très sensible, permettant l'analyse de composés à l'état de traces.
- Identification et quantification :
- La spectrométrie de masse fournit des informations qualitatives et quantitatives. Des expériences MS/MS peuvent être réalisées pour obtenir des détails structurels.
- Applications:
- L'UPLC-MS est largement utilisé dans la métabolomique, la protéomique, l'analyse pharmaceutique, la surveillance environnementale, l'analyse des aliments et des boissons, et bien plus encore.
L'analyse des données:
- Logiciel:
- Des logiciels spécialisés sont utilisés pour l’analyse des données, l’intégration des pics, l’identification des composés et la quantification.
- Correspondance de base de données :
- Les données spectrales de masse peuvent être comparées aux bases de données pour l’identification des composés.
Défis:
- Développement de méthodes :
- Le développement de méthodes UPLC-MS robustes peut nécessiter l’optimisation de paramètres tels que la composition de la phase mobile, les conditions d’ionisation et les paramètres du spectromètre de masse.
- Effets de matrice :
- Les matrices d’échantillons peuvent influencer l’efficacité de l’ionisation et introduire des effets de matrice qui doivent être pris en compte dans l’analyse quantitative.
En résumé, l'UPLC-MS est un outil d'analyse polyvalent et puissant qui allie l'efficacité des séparations UPLC à la sensibilité et à la sélectivité de la spectrométrie de masse. Devenue une technique essentielle dans de nombreux domaines de la chimie analytique, elle est particulièrement utile pour l'analyse complète de mélanges complexes dans diverses applications.
