CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE ULTRA HAUTE PERFORMANCE
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La chromatographie liquide à ultra haute performance (UHPLC) est en effet une technique analytique magistrale pour déterminer l’identité et la quantité de composés dans un échantillon.
Ces machines polyvalentes et de haute précision déterminent à la fois l’identité et la quantité de molécules complexes, notamment les vitamines liposolubles et hydrosolubles. Cela nous permet d’identifier et de différencier divers composés présents dans des mélanges complexes.
L'UHPLC fonctionne en automatisant l'injection d'échantillons liquides dans un système de chromatographie liquide à haute pression, où une séparation et une analyse efficaces ont lieu.
La combinaison du pompage à haute pression, de la technologie de colonne avancée et de l'injection précise d'échantillons fait de l'UHPLC un outil puissant pour les séparations chromatographiques rapides et à haute résolution
L'UHPLC est devenue un outil standard et très précieux dans de nombreux laboratoires en raison de sa rapidité, de sa sensibilité et de sa polyvalence. Voici quelques applications courantes dans lesquelles l'UHPLC est couramment utilisée : analyse pharmaceutique, surveillance environnementale, analyse des aliments et des boissons, recherche clinique et diagnostic, analyse chimique et pétrochimique, études bioanalytiques, analyse médico-légale, recherche et développement.
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La chromatographie liquide à ultra-haute performance (UHPLC) est une technique d'analyse avancée et puissante utilisée pour la séparation, l'identification et la quantification des composés chimiques dans un échantillon. Il s'agit d'une évolution de la chromatographie liquide à haute performance (HPLC) avec des caractéristiques de performance améliorées. Voici les principaux aspects de l'UHPLC en tant qu'outil d'analyse :
- Principe:
- L'UHPLC fonctionne sur les mêmes principes que l'HPLC, impliquant la séparation des composants d'un échantillon liquide en fonction de leur affinité pour une phase stationnaire et une phase mobile.
- La phase stationnaire est généralement conditionnée dans des colonnes et la phase mobile (solvant liquide) est pompée à travers le système sous haute pression.
- Avantages de l'UHPLC :
- Haute pression : L'UHPLC fonctionne à des pressions nettement plus élevées (souvent supérieures à 15 000 psi ou 1 000 bars) que l'HPLC traditionnelle. Cela permet des séparations plus rapides et une résolution améliorée.
- Taille des particules réduite : Les colonnes UHPLC ont généralement des tailles de particules plus petites (inférieures à 2 micromètres), ce qui entraîne une surface accrue et une efficacité de séparation améliorée.
- Sensibilité améliorée : L'UHPLC offre une sensibilité plus élevée et de meilleures formes de pics, ce qui le rend particulièrement utile pour l'analyse d'échantillons complexes et de composants à l'état de traces.
- Temps d'analyse réduit : La combinaison d'une pression élevée et de petites tailles de particules permet des temps d'analyse plus courts, contribuant ainsi à un débit plus élevé.
- Instrumentation:
- Les instruments UHPLC se composent d'une pompe haute pression, d'un injecteur, d'une colonne de séparation, d'un détecteur (généralement UV-Vis, fluorescence ou spectrométrie de masse) et d'un système d'acquisition de données.
- Le système est conçu pour gérer la pression et les débits accrus requis pour les séparations UHPLC.
- Applications:
- L'UHPLC est largement utilisé dans les produits pharmaceutiques, l'analyse environnementale, l'alimentation et les boissons, la recherche clinique et d'autres industries.
- Il est particulièrement utile pour l’analyse de petites molécules, de composés pharmaceutiques, de peptides et de produits naturels.
- Technologie des colonnes :
- Les colonnes UHPLC sont conçues pour résister à des pressions élevées et sont souvent remplies de particules inférieures à 2 micromètres.
- Les dimensions de la colonne et la taille des particules sont essentielles pour obtenir une résolution et une efficacité élevées dans les séparations UHPLC.
- Phase mobile :
- Le choix de la phase mobile dépend de la nature de l'échantillon et des objectifs de séparation.
- Les systèmes UHPLC sont compatibles avec une large gamme de solvants et peuvent utiliser des solvants aqueux et organiques.
- Options du détecteur :
- L'UHPLC peut être couplé à divers détecteurs, notamment UV-Vis, fluorescence et spectrométrie de masse (MS).
- La détection MS offre une spécificité et une sensibilité supplémentaires, ce qui en fait un choix populaire dans les applications UHPLC-MS.
- Développement de méthodes :
- Le développement d’une méthode UHPLC efficace implique l’optimisation de divers paramètres, tels que le type de colonne, la composition de la phase mobile, le profil de gradient et la température.
En résumé, l'UHPLC est un outil d'analyse de pointe qui offre une vitesse, une sensibilité et une résolution améliorées par rapport à l'HPLC traditionnelle. Son fonctionnement à haute pression et sa technologie de colonne avancée en font une technique précieuse pour une large gamme d'applications en chimie analytique et dans les sciences de la vie
